肉的宰后嫩化主要是归因于肌原弹性植物纤维材料成分的损坏，肌原弹性植物纤维材料成分是由内源性球血清淀粉水解不起作用酶可吸附肌原弹性植物纤维材料和组织血癌神经上皮细胞骨架球血清容易造成的。与两百多年来始终是目光主角的钙球血清酶多种，胱天球血清酶（caspases）近些年变成感的兴趣的题。胱天球血清酶在组织血癌神经上皮细胞凋亡的审理周期起着至关非常重要的力，里面caspase-3在死了球血清淀粉水解不起作用中的力是一定要多方位面和麻烦的，于是引起进一点科学探析。S-亚硝基化采用调接钙脱离、养分分泌、球血清质可吸附和组织血癌神经上皮细胞凋亡来调接肉质地，例如嫩度和持水力。刚开始科学探析出现 S-亚硝基化可不可以上涨依赖症线粒体的caspase-3级联不起作用，这有可能是力量组织血癌神经上皮细胞凋亡和鸡肉质量变迁的根本原因。caspase-3的科学探析突出是其与组织血癌神经上皮细胞凋亡的影响，然后，不多有科学探析浅析S-亚硝基化调接caspase-3的措施。

2024年9月由南京市占农业的大部分二本大学张万刚客座教授管理团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物技术为该研究提供了亚硝基化遮盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

常常题目：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

学术期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202多年损害成分：5.7

提出時间：2024年9月

的客户组织：南京农业大学

研究探讨原料：蛋白

拜谱提供数据技术工艺：亚硝基化修饰组学

的技术路线图：

一、科学研究然而

01.Caspase-3灵活性

现今尚不模糊不清NO对caspase-3的克制做用是否需要归因于NO介导的S-亚硝基化，与众不同浓度值系数的GSNO做外源性NO产生，以成脂caspase-3的离体S-亚硝基化。結果认为，与就没有GSNO的组相信，100、200和400μM GSNO组的caspase-3吸附性酶类特殊拉低（图1），与此前简讯一样。GSNO补救拉低caspase-3吸附性酶类的内在原故仍有待于体现了。

图1 不相同氧浓度的GSNO净化处理对caspase-3生物的直接影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化水平

的调查Caspase-3的亚硝基化阶段，以阐发GSNO对Caspase-3的反應性。经GSNO进行处理后，查重工具到caspase-3核蛋白S-亚硝基化构造提升（图2）。这类結果表示，外源性GSNO的培养可顺利引发caspase-3的身体之外S-亚硝基化。另人诧异的是，在未GSNO现实存在的对比组中查重工具到一名衰弱的S-亚硝基化带，这表示caspase-3可能会会发生内源性的S-亚硝基化。另外，本的调查中caspase-3的S-亚硝基化阶段较高，而caspase-3的生物减轻，这与开始之前的的调查不一。不过，caspase-3的炎症因子朋友S-亚硝基化修饰语位点尚不清，还须得进一步推动一个脚印的探求。

图2 GSNO补救对caspase-3S-亚硝基化关卡的不良影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化呈现组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。黑色标示符号的字段说S-亚硝基化肽，网红标示符号的C说S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3可降解结蛋清

结血清看做的至关主要的受损内部骨架血清，在保持肌受损内部格局的格局完正版性和回缩性因素起着至关主要用，钻研S-亚硝基化caspase-3对结血清溶解的强烈性拥有至关主要重要性。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的初始值肌氯纶棉血清）组不同于，0 μM GSNO组（肌原氯纶棉和caspase-3的孵育，无GSNO）的完正版结血清含碳量相关性影响，警告caspase-3对结血清拥有暗藏的血清溶解效率。在GSNO孵育后，完正版结血清的含碳量很明显多（P < 0.05）。不仅而且，当GSNO溶液浓度增高时，完正版结血清的含碳量保持调涨（P < 0.05）（图5）。一项发现了是因为，SNO装饰的caspase-3以平均水平依赖性的形式减弱结血清的溶解。

图5.S-亚硝基化caspase-3光降解结球蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3溶解肌钙血清-T

肌钙球血清酶-T (TnT)是原肌球球血清酶控制承接力量收宿的细细的的都要肌原化学棉纤维棉球血清酶。TnT的吸附塑料塑料共同点是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化條件下，caspase-3对TnT的吸附塑料塑料情況右图6图甲中，与Std组（中含caspase-3和GSNO的肌原化学棉纤维棉）好于，caspase-3组中30 kDa TnT精彩情节有效延长，意味着caspase-3陆续参与了TnT的吸附塑料塑料，不仅而且，caspase-3与GSNO的孵育以至于30 kDa TnT下滑。在100和200 μM GSNO组中沒有检验到清晰的差别的(P > 0.05)，而当GSNO的溶度达到400 μM 时，该精彩情节有效避免(P < 0.05)。一些显示意味着了SNO表达的caspase-3对TnT吸附塑料塑料的控定制用。结球血清酶和TnT是caspase-3的敏锐底物，而GSNO治理 拉低caspase-3的渗透性很有可能以至于肌原化学棉纤维棉球血清酶吸附塑料塑料水平拉低。与此同时所诉，NO介导的S-亚硝基化就能够能够表达半胱氨酸残基来控制caspase-3的渗透性，而能进步骤直接反应其对结球血清酶和TnT的球血清酶蛋白质水解程度，可以直接反应羊肉品質。

图6. S-亚硝基化caspase- 3溶解肌钙球蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本科研广泛宣传浅议S-亚硝基化对caspase-3装饰的影向简述继而对羊肉肌原玻纤身体之外光降解的影向。淀粉酶S-亚硝基化也可以装饰caspase-3的半胱氨酸残基，以此出现caspase-3活性酶调低，进一部促使了其对羊肉肌原玻纤淀粉酶的淀粉酶油脂水解本事。

三、拜谱个人总结

探究通过了酶活法测，亚硝基化呈现组学介绍，WB等的检测的方法，得知核蛋清S-亚硝基化就可以呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这使得了caspase-3化学活化的降低，齐头并进十步调节了其对羊肉肌原纤维板核蛋清的核蛋清水解反应程度。本探究为解释清楚核蛋清质亚硝基化对肉嫩的调整原则给予打了个个新的第一视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶质组学、修饰语淀粉酶质组学、排泄组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列的的产品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total氧化的抹除、游离态巯基，欢迎大家咨询！

考生文献资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663